分光光度計法校準(zhǔn)原理是將混合有特殊物質(zhì)的液體——即溶劑(英文solution)，通過移液器量取后注入目標(biāo)容器，然后通過使用特定的濾波片過濾掉一部分不需要的波長的光后，再對剩余的特定的波長的光進(jìn)行測量，從而由此計算出移液器實際吸取和排出的液體——即溶劑。由分光光度法校準(zhǔn)的原理可見，在采用分光光度法對移液器校準(zhǔn)的過程中，可能對校準(zhǔn)結(jié)果帶來影響的因素主要有：
1 溫度，因為分光光度法同樣需要使用到液體即溶劑，一定質(zhì)量量的溶劑，其容積同樣受到溫度的影響而變化。但如果在用戶所在的場所對移液器進(jìn)行校準(zhǔn)，則此影響可以不計，因為某一個具體用戶所在的場所內(nèi)的溫度變化，相對來說是固定的，那么這種由溫度帶來的影響，同樣也會存在于用戶實際工作中，因此這兩者是可以相互抵消的(乾蕓儀器科技有限公司備注：目前在該領(lǐng)域較為成熟的技術(shù)來自于美國一家實驗室);
2 氣壓，同溫度帶來的影響一樣，由氣壓帶來的影響也是可以相互抵消的;
3 操作人員的操作習(xí)慣帶來的影響，因為分光光度法是可以被直接在終端用戶使用場所應(yīng)用的一種移液器校準(zhǔn)方法，其操作方法相對于傳統(tǒng)的衡量法(或稱重法)更為簡單、可靠，因此*可由移液器的使用者來直接對其使用的移液器采用分光光度法進(jìn)行校準(zhǔn)。這樣操作者的操作習(xí)慣在校準(zhǔn)過程中表現(xiàn)出來的差異同樣存在與今后的使用過程中，這兩者之間的差異也可以相互抵消的;
4 環(huán)境濕度，因為分光光度法不是對移液器排出的溶劑進(jìn)行稱量，而是對溶劑中所包含的特殊物質(zhì)的光波進(jìn)行測量，同時這種特殊物質(zhì)是不可揮發(fā)的，因此在整個測試過程中，其已經(jīng)通過移液器排出的溶劑，無論其質(zhì)量如何變化，但結(jié)果是不會受到影響的，也就是不需要對環(huán)境的干濕度進(jìn)行控制。
至此我們幾乎可以說，針對移液器采用分光光度發(fā)進(jìn)行校準(zhǔn)，其整個的測試過程是幾乎不受環(huán)境因素影響的，如溫度、氣壓、干濕度等，同時因在這一校準(zhǔn)過程中，校準(zhǔn)人和終使用人可以做到是同一人，從而因人的因素而帶來的差異也是降到低的。當(dāng)然這種方法也不確定因素，比如分光光度法設(shè)備及使用的試劑自身也必然存在一定的誤差，這與傳統(tǒng)的衡量法(或稱重法)里測量儀器自身的誤差一樣，比如電子天平自身的誤差、溫度計自身的誤差、干濕度計以及氣壓計自身的誤差等，但這些來自于測量設(shè)備、溶劑自身的誤差，通常是恒定的，并且是可以事先測量、估算的，可以通過的測量數(shù)據(jù)進(jìn)行修正的方法來避免的。
當(dāng)然，目前分光光度法作為一種針對移液器校準(zhǔn)的新的應(yīng)用方法還是剛剛興起，在國外也只有少數(shù)研究機(jī)構(gòu)或?qū)嶒炇以谑褂茫谖覈壳皟H停留在理論層面的評估上，并沒有在實際中推廣、應(yīng)用。但因為分光光度法不受環(huán)境因素干擾，且設(shè)備攜帶方便，使得其應(yīng)用環(huán)境更為隨意、寬廣，因此根據(jù)我們乾蕓儀器科技有限公司多年的行業(yè)經(jīng)驗認(rèn)為，這種新型的針對移液器校準(zhǔn)的方法，在不久的將來，將會得到更多用戶的肯定與承認(rèn)。

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分光光度法校準(zhǔn)原理